Sources pour la fluorescence

Le choix de la source de fluorescence pour un microscope va conditionner les sondes fluorescentes observables sur le microscope et les méthodes d’acquisition. Si les sources LED sont devenues la référence, il faut également choisir entre des sources dites blanches et des sources contenant plusieurs LED à différentes longueurs d’ondes. 

• Les sources LED dites blanches permettent d’utiliser facilement les filtres présents déjà en place sur un microscope (à condition qu’ils soient compatibles avec les spectre d’émission de la LED blanche évidement). Le passage d’une couleur à une autre se fait forcément avec un mouvement de la tourelle de filtre. On peut les utiliser avec des filtres multi bandes mais dans ce cas on ne pourra pas doser l’équilibre des intensités entre les marqueurs fluorescents à l’observation. 
• Les sources LED multi couleurs permettent d’utiliser des filtres existants dont les excitations correspondent aux longueurs d’ondes des LED de la source. Il sera alors moins facile de multiplier le nombre de filtres du microscope. Lors de l’utilisation de filtres multi bandes adaptés, il sera à présent facile de moduler les niveaux des couleurs observées individuellement en jouant sur l’intensité de la LED concernée. Le fait de pouvoir exciter les sondes individuellement en utilisant un filtre multi couleurs permet également d’automatiser une imagerie à plusieurs canaux de fluorescence même sur un microscope manuel. Ce procédé sera également utiliser sur les microscopes motorisés pour de l’imagerie très rapide entre deux couleurs. En effet cette approche ne nécessitant pas de mouvement mécanique « lents » comme la rotation d’une roue de filtres, le changement couleur sera rapide car uniquement liés à de l’électronique.